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上海elisa試劑盒公司|廣銳生物

(IMA)酶聯免疫分析

時間:2014-12-3閱讀:275
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廣銳生物-國內高、優Elisa試劑盒供應商 (IMA)酶聯免疫分析

酶標包被板    1×48
標準品:1800nmol/L    0.5ml×1瓶
標準品稀釋液    1.5ml×1瓶
酶標試劑    3 ml×1瓶
樣品稀釋液    3 ml×1瓶

 

(IMA)酶聯免疫分析

操作步驟:
1.    標準品的稀釋與加樣:在酶標包被板上設標準品孔10孔,在*、第二孔中分別加標準品100μl,然后在*、第二孔中加標準品稀釋液50μl,混勻;然后從*孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉,再各取50μl分別加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul,混勻;混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl,混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。(稀釋后各孔加樣量都為50μl,濃度分別為1200nmol/L,800nmol/L ,400nmol/L,200nmol/L,100nmol/L)。
2.    加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3.    溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.    配液:將30(48T的20倍)倍濃縮洗滌液用蒸餾水30(48T的20倍)倍稀釋后備用。
5.    洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6.    加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7.    溫育:操作同3。
8.    洗滌:操作同5。
9.    顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘. 
10.    終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
11.    測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

 

(IMA)酶聯免疫分析

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