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今日知識推薦-大腸埃希氏菌初步生化與鑒定

閱讀:406發布時間:2014-12-18

初步生化試驗

在CT-SMAC 和改良CHROMagar O157 顯色瓊脂平板上挑取5 個~10 個典

型或可疑菌落,分別接種TSI 瓊脂,同時接種MUG-LST 肉湯,并用已知MUG陽性的大腸埃希氏菌株做對照,于36℃±1℃培養18h~24h。必要時進行氧化酶試驗和革蘭氏染色。在TSI 瓊脂中,典型菌株為斜面與底層均呈黃色,產氣或不產氣,不產生硫化氫(H2S)。置MUG-LST 肉湯管于長波紫外燈下觀察,MUG陽性的大腸埃希氏菌株應有熒光產生,大腸埃希氏O157:H7/NM 無熒光;對分解乳糖且無熒光的菌株,在營養瓊脂平板上分純,于36℃±1℃培養18h~24h,并進行下列鑒定。

鑒定

血清學試驗

在營養瓊脂平板上挑取分純的菌落,用O157:H7 標準血清或O157 乳膠凝集試劑作玻片凝集試驗。對于H7 因子血清不凝集者,應穿刺接種半固體瓊脂,檢查動力,經連續傳代3 次,動力試驗陰性,H7 因子血清凝集陰性者,確定為無動力株。

生化試驗

用API20E 生化鑒定試劑盒或VITEK-GNI+檢測卡,按照生產商提供的使用

說明進行。大腸埃希氏菌O157:H7/NM 生化反應特征見表。

生化試驗 特征反應
三糖鐵瓊脂 底層及斜面呈黃色,H2S 陰性
* 陰性或遲緩發酵
靛基質 陽性
MR-VP MR 陽性,VP 陰性
氧化酶 陰性
西蒙氏檸檬酸鹽 陰性
賴氨酸脫羧酶 陽性(紫色)
*脫羧酶 陽性(紫色)
纖維二糖發酵 陰性
棉子糖發酵 陽性
MUG 試驗 陰性(無熒光)
動力試驗 有動力或無動力


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