細胞支原體污染一般情況及預(yù)防措施:

細胞株若受到細菌、真菌、支原體、或是特定病毒等之污染時，會嚴重的影響實驗的結(jié)果。而細菌、真菌等之微生物污染時，較易自培養(yǎng)基等的外觀變化察覺。但是若受到支原體之污染時，細胞之外觀較無明顯變化，但是其污染會造成細胞之生長速率緩慢、細胞產(chǎn)生病變之型態(tài)改變等等變化。

各國細胞庫支原體污染的統(tǒng)計表，如下：
    國家　   受支原體污染(%)   報告年度
    USA－FDA   15   1993(past 30 years)
    USA－ATCC   15-20   1992
    Japan－(IFO，RIKEN，JCR 80~30~22   1981 1987-19931998
    Germany－DSM   36   1990-1994
    Argentina   65   1987
    Israel   32   1986-1993
    China   95    1990

造成支原體高污染率的原因為： 
    1.支原體size 0.1~0.8 um，無細胞壁，可透過一般過濾膜（0.22-0.45 um） 
    2.支原體污染時，沒有明顯的肉眼或一般光學(xué)顯微鏡可觀察到的特征變化 
    3.過去缺乏簡單、快速且可靠的檢測方式 
    4.細胞流通間缺乏品管，造成實驗室間的相互污染 
    5.研究或操作人員忽略污染問題

而支原體污染來源： 
    1.已受污染的細胞 
    2.操作人員的疏失 
    3.已受污染的培養(yǎng)基、血清 
    4.操作環(huán)境不良、實驗器具不潔等

由于支原體為人體口腔中之正常菌叢，實驗室之操作人員的污染亦可能為污染源，須十分注意。而萬一細胞已受支原體污染時，*的處理原則為將細胞高壓滅菌后丟棄，以免污染其它潔凈的細胞株。但是若是堅持要作去除支原體污染，有以下幾種方法，只不過結(jié)果會與原始的細胞特性有差異。

去除支原體污染： 
    1. 抗生素處理：BM-cyclin（Roche），MRA（mycoplasma removal agent，ICN），Ciprofloxcin（Bayer），Enrofloxacin（Bayer） 
    2. Nucleic acid metabolites：5-bromouracil，Hoechst 33258，bromodeoxyuridine 
    3. Anti-sera

預(yù)防與控制方面可從以下各點加強注意：
    設(shè)備方面： 
    1.使用已作支原體測試ok之細胞株 
    2.于另一隔離之區(qū)域操作未知是否有支原體污染之細胞 
    3.使用不添加抗生素的培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞 
    檢測方面：定期以標準的支原體檢測方法檢測細胞、培養(yǎng)基、血清、ddH2O有否被支原體污染。
    實驗操作人員之無菌觀念與無菌操作技術(shù)之要求。

有關(guān)支原體污染之問題與回答：
    Q:應(yīng)如何避免細胞污染？
    A:細胞污染的種類可分成細菌、酵母菌、霉菌、病毒和支原體。 主要的污染原因為無菌操作技術(shù)不當(dāng)、操作室環(huán)境不佳、污染之血清和污染之細胞等。 嚴格之無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染之方法。
    Q:如果細胞發(fā)生微生物污染時， 應(yīng)如何處理？
    A:直接滅菌后丟棄之。