尿素氮（BUN）試劑盒說明書 
                                                           分光光度法 50 管/48樣 
注意：正式測定之前選擇 2-3 個預期差異大的樣本做預測定。 
測定意義 
尿素是生物體內含氮化合物分解的終產物，在尿酶催化下分解轉化成氨。血液尿素氮是腎功
能的主要指標之一。 
測定原理 
在堿性條件下，尿酶水解尿素產生氨，氨與次氯酸反應生成氯胺，再與酚衍生物作用生成綠
色吲哚酚，在 630nm處有特征吸收峰。 
尿素氮（BUN）試劑盒說明書 自備實驗用品及儀器 
天平、研缽、常溫離心機、可見分光光度計、1 mL 玻璃比色皿、恒溫水浴鍋。 
試劑組成和配制         
標準品：液體 1mL× 1 支，4℃保存。 
試劑一：粉劑× 1 瓶，4℃避光保存，臨用前加 10mL 蒸餾水充分溶解。 
試劑二：液體 20mL× 1 瓶，4℃避光保存。 
試劑三：液體 20mL× 1 瓶，4℃避光保存。 
樣品處理 
1.  組織：按照質量（g）：蒸餾水體積(mL)為 1：5~10 的比例（建議稱取約 0.1g，加入1mL
蒸餾水）加入蒸餾水，勻漿后于 25℃，10000g 離心 10min，取上清待測。 
2.  細胞：按照細胞數量（104
個）：蒸餾水體積（mL）為 500~1000：1 的比例（建議 500
萬細胞加入 1mL 蒸餾水），冰浴超聲波破碎細胞（功率 300w，超聲 3 秒，間隔 7 秒，
總時間 3min） ；然后 4℃，10000g 離心10min，取上清置于冰上待測。 
3.  血清或其它液體：直接檢測。                                             
尿素氮（BUN）試劑盒說明書 測定操作 
  空白管  標準管  測定管 
樣品（μL）      100 
標準品（μL）    100   
H2O（μL）  100     
試劑一（μL）  200  200  200 
充分混勻，于 37℃反應10min 
試劑二（μL）  350  350  350 
試劑三（μL）  350  350  350 
充分混勻，于 37℃顯色10min，于 1mL 玻璃比色皿，雙蒸水調零，測定 630nm處吸光值，
記為 A 空白管、A標準管和 A測定管 
注意：空白管和標準管只需測定一次。 
 計算公式 
1.  按樣本質量計算 
尿素氮含量（mg/g  鮮重）=
空白管 標準管
空白管 測定管
A - A
A - A
×C 標準品÷W 
= 0.005×
空白管 標準管
空白管 測定管
A - A
A - A
÷W 
2.  按細胞數量計算
尿素氮含量（mg/104
 cell）=
空白管 標準管
空白管 測定管
A - A
A - A
×C 標準品÷細胞數量 
= 0.005×
空白管 標準管
空白管 測定管
A - A
A - A
÷細胞數量 
3.  按液體體積計算 
尿素氮含量（mg/L）=
空白管 標準管
空白管 測定管
A - A
A - A
×C 標準品 
=5×
空白管 標準管
空白管 測定管
A - A
A - A
 
C 標準品：標準品濃度，5mg/L；W：樣品質量，g 
 
 注意事項 
1.  配制好的試劑一在 2-8℃條件下可保存一周。 
2.  zui低檢出限為 80μ g/L。