牛免疫球蛋白A(IGA)ELISA試劑盒用于測定血清，血漿及相關(guān)液體樣本中牛免疫球蛋白A(IgA)含量。

實(shí)驗(yàn)原理

是采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA），往預(yù)先包被牛免疫球蛋白A(IGA)捕獲抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本、標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體，經(jīng)過溫育并*洗滌，用底物TMB顯色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成終的，顏色的深淺和樣品中的牛免疫球蛋白A(IGA)呈正相關(guān)，用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度（OD值），計(jì)算樣品免疫球蛋白A(IGA)的濃度。

牛免疫球蛋白A(IGA)ELISA試劑盒操作步驟：

1.取出試劑盒，室溫（20-25℃）放置30分鐘。

2.分組：取出96孔板，根據(jù)待測樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)，把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理，分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組（6個濃度）、空白孔、待測樣品組。

注：為減少實(shí)驗(yàn)誤差，保證準(zhǔn)確性，建議設(shè)置復(fù)孔。

3.加樣：依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入50ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中，空白對照孔加入50ul的蒸餾水，其余微孔中加入50ul的待測樣本。

4.加酶標(biāo)溶液：標(biāo)準(zhǔn)品組、待測樣本組各孔中加入100ul的酶標(biāo)溶液（空白對照孔除外）。

5.溫育：酶標(biāo)板用封板紙密封后，放入濕盒內(nèi)于37℃恒溫孵育1小時。

6.洗板：用稀釋后的洗滌液注滿每孔，靜置15-30s，充分清洗酶標(biāo)板5次，用吸水紙*拍干。

7.顯色：各孔加入顯色劑A液50ul后，再加入顯色劑B液50ul。

8.終止：25-37℃下避光反應(yīng)10-15分鐘，加入50ul終止液。

9.讀板：在450nm波長讀取各孔的OD值。