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上海紀寧實業有限公司

人的實驗技術和試劑盒實驗原理

時間:2017-5-11閱讀:842
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ELISA試劑盒是以免疫學反應為根底,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化效果相結合起來的一種敏感性很高的實驗技能。因為抗原、抗體的反應在一種固相載體──聚苯乙烯微量滴定板的孔中進行,每參加一種試劑孵育后,可通過洗刷除去多余的游離反應物,然后確保實驗成果的特異性與穩定性。在實踐使用中,通過不一樣的規劃,詳細的辦法過程可有多種。即:用于檢查抗體的間接法(圖a)、用于檢查抗原的雙抗體夾心法(圖b)以及用于檢查小分子抗原或半抗原的抗原競爭法等等。對比常用的是ELISA雙抗體夾心法及ELISA間接法。 

ELISA試劑盒提示您操作時應留心:
1、底物A應蒸發,防止經久翻開蓋子,底物B對光活絡,防止經久露出于光下,防止用手觸摸,試驗完成后應立即讀取OD值。
2、試驗中不必的板條應立即放回包裝袋中,密封保留,防止蛻變。
3、試劑應按標簽說明書儲存,運用前恢復到室溫,稀釋后的規范品應丟掉,不可保留。
4、運用一次性的吸頭防止穿插污染,防止運用帶金屬的加樣器。
5、依照說明書中標明的時刻、加液的量及次序進行溫育操作。
6、不用的其它試劑應包裝好或蓋好,不相同批號的試劑不要混用,保質期前運用。
7、洗刷酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反響孔中吸水。
8、運用潔凈的塑料容器配備洗刷液,使用前充沛混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

ELISA試劑盒用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗該目標抗體的微孔中依次參加標本或規范品、生物素化的抗該目標抗體、HRP符號的親和素,通過*洗刷后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色,并在酸的效果下轉化成終究的。色彩的深淺和樣品中的該目標呈正有關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),核算樣品濃度。 

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