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血清提取蛋白的制作方法:
1、取經過穩定的血液,作離心分離15~30分鐘,每分鐘轉速為2500~3000轉,從而取得固形物,去除血漿,用水使固形物沉渣溶解。
2、置血紅素于培養基中,為了使培養基酸化而使血紅素分子中的二價鐵血紅素和血球蛋白的結合體分離,預先制備好醋酸和氯化鈉的混合物并將它加熱到90~110℃。
3、混合時將固形物的溶血產物緩慢地添加到加熱的混合物中,重新把溫度逐漸地升高到沸點,煮沸5~15分鐘,以便使結合體*分離,接著將混合物逐步冷卻到室溫。
4、為了使二價鐵血紅素溶解并消除,在混合物中按溶物產物比值2∶1~5∶1添加*醚,這時提取出來的蛋白質呈白棉絮狀,將溶液過濾,再用*醚清洗。
5、100毫升血中提取的蛋白質產品相當于14.4克,應用這種方法,每100毫升的血液可提高蛋白質得率45%。
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