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乙酸激酶(ACK)測試盒_其它系列

參  考  價:面議
具體成交價以合同協議為準

產品型號50管/48樣

品牌

廠商性質經銷商

所在地上海市

更新時間:2022-07-29 10:48:58瀏覽次數:597次

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品牌 紀寧生物 貨期 現貨供應
有效期 6個月 用途 僅供科研實驗使用
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乙酸激酶(ACK)測試盒_其它系列

測定方法:分光光度法

產品規格:50管/48樣

注   意 :正式測定前務必取2-3個預期差異較大的樣本做預測定

測定意義:                           

ACK主要存在于微生物中,催化乙酸和ATP生成乙酰磷酸和ADP,是細菌碳代謝和能量代謝的關鍵酶,尤其是在古細菌甲烷合成代謝中起著中樞作用。

乙酸激酶(ACK)測試盒_其它系列

測定原理:

(1)ACK催化乙酸鈉和ATP生成乙酰磷酸和ADP,(2)丙酮酸激酶催化ADP和PEP生成ATP和丙酮酸,(3)乳酸脫氫酶催化丙酮酸和NADH生成乳酸和NAD+,(4)在340nm下測定NADH氧化生成NAD+速率,即可反映ACK活性。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水

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試劑組成和配制:

提取液:液體50mL×1瓶,4℃保存;

試劑一:液體60mL×1瓶,4℃保存;

試劑二:粉劑×2瓶,-20℃保存;

試劑三:液體1.2mL×1支,4℃保存;

樣本的前處理:

1、細菌或培養細胞:先收集細菌或細胞到離心管內,離心后棄上清;按照細菌或細胞數量(104個):提取液體積(mL)為500~1000:1的比例(建議500萬細菌或細胞加入1mL提取液),超聲波破碎細菌或細胞(冰浴,功率20%或200W,超聲3s,間隔10s,重復30次);15000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

2、組織:按照組織質量(g):提取液體積(mL)為1:5~10的比例(建議稱取約0.1g組織,加入1mL提取液),進行冰浴勻漿。15000g 4℃離心10min,取上清,置冰上待測。

測定步驟:

1、分光光度計或酶標儀預熱30min以上,調節波長至340nm,蒸餾水調零。

2、樣本測定

(1)工作液的配置:臨用前取試劑二一瓶,加入25mL試劑一和500μL試劑三,充分混合溶解,置于37℃(哺乳動物)或25℃(其它物種)水浴5min;現配現用;

(2)在1mL石英比色皿中加入100μL樣本和900μL工作液,混勻,立即記錄340nm處20s時的吸光值A1和 3min20s后的吸光值A2,計算ΔA=A1-A2。

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