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液相色譜技術(shù)(HPLC)

閱讀:1079發(fā)布時間:2011-5-5

液相色譜技術(shù)(HPLC)
  盡管二維凝膠電泳(2-DE)是目前常用的對全蛋白組的分析方法,但其存在分離能力有限、存在歧視效應(yīng)、操作程序復(fù)雜等缺陷。對于分析動態(tài)范圍大、低豐度以及疏水性蛋白質(zhì)的研究往往很難得到滿意的結(jié)果。Chong 等使用HPLC/ 質(zhì)譜比較分析惡性腫瘤前和癌癥兩種蛋白質(zhì)差異表達(dá)。利用HPLC 分離蛋白質(zhì),并用MALDI-TOF-MS 鑒定收集的組分,從而在兩種細(xì)胞中的差異表達(dá)中對蛋白質(zhì)進(jìn)行定量分析。多維液相色譜作為一種新型分離技術(shù),不存在相對分子質(zhì)量和等電點(diǎn)的限制,通過不同模式的組合,消除了二維凝膠電泳的歧視效應(yīng),具有峰容量高、便于自動化等特點(diǎn)。二維離子交換- 反相色譜(2D-IEC-RPLC)是蛋白質(zhì)組學(xué)研究中zui常用的多維液相色譜分離系統(tǒng)。


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