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人Ⅱ型肺泡上皮細胞永生化細胞專用培養基實驗步驟

時間:2025/5/15閱讀:17
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人Ⅱ型肺泡上皮細胞永生化細胞專用培養基實驗步驟:

細胞復蘇

1.將10ml移液管、移液槍、1ml槍頭、50ml離心管、T25培養瓶、酒精燈、廢液缸等物品放入超凈工作臺,紫外燈照射30min后再通風30min;

2.預熱培養基;

3.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;

4.將凍存細胞從液氮罐中取出;

5.放入一次性手套于37℃水浴鍋中快速晃動使其融化;

6.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;

7.吸取9ml培養基到50ml離心管中;

8.用1ml槍頭吸取解凍的細胞懸液于離心管中;

9.1000r/min,離心5min;

10.用75%酒精消毒后放入超凈工作臺;

11.吸棄上清液;

12.吸取1ml培養基重懸細胞,將細胞懸液轉移到培養瓶內,補加適量培養基,輕輕晃動培養瓶使細胞分布均勻,并做好標記;

13.在顯微鏡下觀察復蘇的細胞密度及狀態;

14.將細胞放回二氧化碳培養箱中靜置培養。


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