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規(guī)格	1×106cells/T25培養(yǎng)瓶	種屬	人
貨號(hào)	CS-X2074	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣

商品介紹：

產(chǎn)品名稱：DLD-1 (人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞)
別稱 DLD 1; DLD1; CoCL3

種屬人類

年齡（性別）成人

組織來(lái)源結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞

生長(zhǎng)特性貼壁細(xì)胞

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

背景描述 DLD-1細(xì)胞是由D·L·Dexter和其同事于1977-1979年分離的兩株結(jié)直腸腺癌細(xì)胞株中的一株。在ATCC和其它地方進(jìn)行的DNA指紋鑒定和染色體組型分析表明DLD-1細(xì)胞與HCT-15細(xì)胞相似，說(shuō)明這兩者是來(lái)自同一個(gè)人的不同克隆。DLD-1細(xì)胞和HCT-15細(xì)胞的遺傳起源可通過(guò)DNA指紋鑒定證實(shí)，但染色體組型分析顯示它們?nèi)狈θ旧w標(biāo)記一致改變或數(shù)目上一致改變。DLD-1細(xì)胞的CSAp陰性(CSAp-)，p53抗原表達(dá)呈陽(yáng)性(p53抗原產(chǎn)生了一個(gè)C→T點(diǎn)突變導(dǎo)致241位的Ser→Phe)。DLD-1細(xì)胞角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性，癌基因c-myc、K-ras、H-ras、N-ras、myb、sis和fos的表達(dá)呈陽(yáng)性，癌基因N-myc的表達(dá)未做檢測(cè)。DLD-1細(xì)胞表達(dá)腫瘤特異性核基質(zhì)蛋白CC-2、CC-3、CC-4、CC-5和CC-6。1979年提交到ATCC的DLD-1細(xì)胞代數(shù)不明且污染了支原體，其后經(jīng)過(guò)12周多種抗生素聯(lián)合培養(yǎng)處理，處理之后每周用Hoechst染色和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)法檢測(cè)。其后連續(xù)11個(gè)月不加抗生素培養(yǎng)，DLD-1細(xì)胞所有的檢測(cè)呈陰性。

生物安全等級(jí) 1

生長(zhǎng)培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

倍增時(shí)間 ~24-48小時(shí)

凍存條件

凍存液：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

致瘤性 Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).

抗原表達(dá)情況 Blood Type O. The cells are weakly positive for keratins and vimentin. The cells are positive for keratin by immunoperoxidase staining. DLD-1 cells are positive for p53 antigen expression (the p53 antigen produced has a C -> T mutation re

基因表達(dá)情況 carcinoembryonic antigen (CEA) 0.5 ng/10^6 cells/10 days; colon antigen 3.

產(chǎn)品信息：

貨號(hào)	CS-X2074	種屬	人
生長(zhǎng)特性	貼壁細(xì)胞	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
溫度	液氮	培養(yǎng)條件:	氣相：空氣，95%；CO2，5%
鑒定	STR鑒定正確	生長(zhǎng)培養(yǎng)基	RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

DLD-1 (人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞)

細(xì)胞保存方法：

（一）細(xì)胞凍存

1. 配制含10%DMSO或甘油、10～20%小牛血清的凍存培養(yǎng)液；

2. 取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的細(xì)胞，去除舊培養(yǎng)液，用PBS清洗。

3. 去除PBS，加入適量（覆蓋培養(yǎng)皿表面）把單層生長(zhǎng)的細(xì)胞消化下來(lái)；

4. 離心1000rpm，5min；

5. 去除，加入適量配制好的凍存培養(yǎng)液，用吸管輕輕吹打使細(xì)胞均勻，計(jì)數(shù)，調(diào)節(jié)凍存液中細(xì)胞的最終密度為5×106/ml～1×107/ml；

6. 將細(xì)胞分裝入凍存管中，每管1～1.5 ml；

7. 在凍存管上標(biāo)明細(xì)胞的名稱，凍存時(shí)間及操作者；

8. 凍存：標(biāo)準(zhǔn)的凍存程序?yàn)榻禍厮俾?1～-2℃/ min；當(dāng)溫度達(dá)-25℃以下時(shí)，可增至-5℃～-10℃/min；到-100℃時(shí)，則可迅速浸入液氮中。也可將裝有細(xì)胞的凍存管放入-20℃冰箱2h ，然后放入-70℃冰箱中過(guò)夜，取出凍存管，移入液氮容器內(nèi)。

DLD-1 (人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞)

注意事項(xiàng)：

1）、欲冷凍保存之細(xì)胞應(yīng)在生長(zhǎng)良好且存活率高之狀態(tài)，約為80～90%致密度。冷凍前檢測(cè)細(xì)胞是否仍保有其性質(zhì)，應(yīng)在冷凍保存前一至二日測(cè)試是否有抗體之產(chǎn)生。

2）、細(xì)胞在液氮中可長(zhǎng)期凍存無(wú)，而不會(huì)影響細(xì)胞活力;在-70度可保存數(shù)月。

3）、注意冷凍保護(hù)劑之品質(zhì)。DMSO應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí)，無(wú)菌且無(wú)色(以0. 22micron FGLP Telflon過(guò)濾或是直接購(gòu)買無(wú)菌產(chǎn)品，如Sigma D-2650)，以5～10 ml小體積分裝，4 ℃避光保存，勿作多次解凍。Glycerol亦應(yīng)為試劑級(jí)等級(jí)，以高壓蒸汽滅菌后避光保存。在開(kāi)啟后一年內(nèi)使用，因長(zhǎng)期儲(chǔ)存后對(duì)細(xì)胞會(huì)有毒性。本方法中先制備雙倍凍存液，可避免DMSO直接加入時(shí)釋放的熱量對(duì)細(xì)胞的損傷。緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液是使細(xì)胞逐步適應(yīng)高滲，可降低細(xì)胞受損。DMSO可能引起部分白血病細(xì)胞株的分化，可換用10%甘油凍存。

操作步驟：

1）、冷凍前24-48小時(shí)更換半量或全量培養(yǎng)基，使細(xì)胞處于指數(shù)生長(zhǎng)期。

2）、配制冷凍保存溶液(使用前配制)：另取一離心管，加入培養(yǎng)基、血清，逐滴加入二甲基亞砜 (DMSO)至20%濃度，即制成雙倍的凍存液，置于室溫下待用。

3）、離心收集培養(yǎng)之細(xì)胞，用加血清的培養(yǎng)基重懸起細(xì)胞，取少量細(xì)胞懸浮液(約0. 1 ml)計(jì)數(shù)細(xì)胞濃度及凍前存活率。

4）、取與細(xì)胞懸液等量的凍存液，緩慢逐滴加入細(xì)胞懸液，并晃動(dòng)試管，制成細(xì)胞凍存懸液(DMSO后濃度為5～10%)，使細(xì)胞濃度為1～5×106cells/ ml，混合均勻，分裝于已標(biāo)示之冷凍保存管中，1～2 ml/vial，并取少量細(xì)胞懸浮液作污染檢測(cè)。嚴(yán)密封口后，注明細(xì)胞名稱、代數(shù)、日期。然后進(jìn)行凍存。

公司正在出售的產(chǎn)品：

K-562 [K562] (人慢性髓原白血病細(xì)胞)	豬瘦su(LEP)試劑盒elisa
人滑膜細(xì)胞	人細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)試劑盒ELISA
小鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞	雞白血病病毒抗原(ALV-AG)ELISA檢測(cè)試劑盒
大鼠表皮角質(zhì)形成細(xì)胞	大鼠α1suan性糖蛋白(α1-AGP)ELISA檢測(cè)試劑盒
人骨骼肌細(xì)胞	基因PCR試劑盒
小鼠毛囊細(xì)胞	牛細(xì)小病毒PCR試劑盒
大鼠毛囊細(xì)胞	禽輪狀病毒PCR檢測(cè)試劑盒
人關(guān)節(jié)軟骨細(xì)胞	禽網(wǎng)狀內(nèi)皮組織增殖病病毒PCR檢測(cè)試劑盒
人椎間盤髓核細(xì)胞	白色念珠菌PCR試劑盒
人真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞	豬乳頭瘤病毒PCR試劑盒
人真皮淋巴上皮細(xì)胞	豬水泡病病毒PCR檢測(cè)試劑盒
大鼠表皮黑色素細(xì)胞	白樂(lè)杰馬杜拉放線菌PCR檢測(cè)試劑盒
小鼠表皮黑色素細(xì)胞	DLD-1 (人結(jié)直腸腺癌上皮細(xì)胞)巴氏阿米巴原蟲(chóng)PCR檢測(cè)試劑盒
人表皮角化細(xì)胞	豬水皰疹病毒PCR檢測(cè)試劑盒
大鼠腦動(dòng)脈血管內(nèi)皮細(xì)胞	伊麗莎白巴爾通體PCR檢測(cè)試劑盒