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芽孢染色的幾種方法介紹

閱讀:1332發布時間:2017-5-16

芽孢染色的幾種方法介紹

方法1
(1)將培養24小時左右的枯草芽孢桿菌或其他芽孢桿菌,作涂片、干燥、固定。
(2)滴加3—5滴孔雀綠染液于已固定的涂片上。
(3)用木夾夾住載玻片在火焰上加熱,使染液冒蒸汽但勿沸騰,切忌使染液蒸干,必要時可添加少許染液。加熱時間從染液冒蒸汽時開始計算約4—5分鐘。這一步也可不加熱,改用飽和的孔雀綠水溶液(約7.6%)染10分鐘。
(4)傾去染液,待玻片冷卻后水洗至孔雀綠不再褪色為止。
(5)用番紅水溶液復染1分鐘,水洗至水為無色。
(6)待干燥后,置油鏡觀察,芽孢呈綠色,菌體呈紅色。
注意
(1)選用適當菌齡的菌種,幼齡菌尚未形成芽孢,而老齡菌芽孢囊已經破裂。
(2)加熱染色時必須維持在染液冒蒸汽的狀態,加熱沸騰會導致菌體或芽孢囊破裂,加熱不夠則芽孢難以著色。
方法2
(1)取二支潔凈的小試管,分別加入0.2ml無菌水,再往一管中加入1—2接種環的蠟狀芽孢桿菌的菌苔,另一管中加入1—2接種環的生孢梭菌的菌苔,兩管各自充分混合成濃厚的菌懸液。
(2)在菌懸液中分別加入0.2ml苯酚品溶液,充分混合后,于沸水浴中加熱3—5分鐘。
(3)用接種環分別取上述混合液2—3環于兩片載玻片上,涂薄,風干后,將載玻片稍傾斜于燒杯上,用95%乙醇沖洗至無紅色液流出。
(4)再用自來水沖洗,濾紙吸干。
(5)取1—2接種環黑色素溶液于涂片處,立即展開涂薄,自然干燥后,油鏡觀察,在淡紫灰色背景的襯托下,菌體為白色,菌體內的芽孢為紅色。
 


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