凝集素的應(yīng)用

【資料簡介】

公司主營產(chǎn)品有：elisa試劑盒，標(biāo)準(zhǔn)品，培養(yǎng)基，血清，細(xì)胞，抗體等產(chǎn)品。

 

 

        一般認(rèn)為細(xì)胞膜上特定的糖基可用以區(qū)別細(xì)胞的類型和反映細(xì)胞在分化、成熟和腫瘤細(xì)胞性變中的變化。僅在某些特殊的例子，其細(xì)胞結(jié)合凝集素的性能可以預(yù)先估計(jì)，如雙花扁豆素之于血型A物質(zhì)的特異性，荊豆凝集素之于血型O物質(zhì)2—L—巖藻糖的特異性，然而在絕大多數(shù)情況下，關(guān)于由凝集素所識別的碳水化合物決定簇的種類，關(guān)于攜帶決定簇的分子的性質(zhì)和機(jī)能，*憑實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)去發(fā)現(xiàn)。

 

 　　1．作為細(xì)胞分化和成熟的標(biāo)記，應(yīng)用凝集素作為細(xì)胞分化的標(biāo)志，在這方面的應(yīng)用報(bào)告zui多，而且研究比較集中于血細(xì)胞，特別是淋巴細(xì)胞的分群。如Rose（1980）等發(fā)現(xiàn)在小鼠胸腺皮質(zhì)內(nèi)不成熟的T淋巴細(xì)胞呈PNA陽性反應(yīng)，在小鼠小腸集合淋巴小結(jié)的生發(fā)中心也發(fā)現(xiàn)有20%左右的PNA陽性反應(yīng)細(xì)胞，后者是否屬于不成熟的T淋巴細(xì)胞，是值得進(jìn)一步研究的問題。Newman等（1979）以熒光素標(biāo)記凝集素PNA，發(fā)現(xiàn)在大鼠乳腺上皮的不同分化時(shí)期顯示不同的熒光強(qiáng)度。在不成熟的大鼠乳腺上皮細(xì)胞，熒光弱或無，隨著性成熟期到妊娠期乳腺上皮熒光程度逐漸加強(qiáng)，而泌乳期熒光強(qiáng)度達(dá)zui高峰。在皮膚角質(zhì)細(xì)胞自基底向表層分化、成熟的過程中，細(xì)胞表面的碳水化合物的分布和性質(zhì)都在改變。Brabed等（1981）應(yīng)用新生大鼠皮膚的實(shí)驗(yàn)表明，皮膚各層細(xì)胞分別與不同的凝集素相結(jié)合。麥芽素與角質(zhì)化細(xì)胞相結(jié)合，蓖麻素與棘細(xì)胞和基底細(xì)胞相結(jié)合，而荊豆凝集素標(biāo)記在棘細(xì)胞的表面。在成肌細(xì)胞（myeoblast）的分化與成熟過程中，Winaod 和Luzzati（1975）注意到類似的皮膚的改變。

 

 　　2．作為細(xì)胞特殊類型的標(biāo)記　Kivela和Farkkanen（1987）發(fā)現(xiàn)在人視網(wǎng)膜，PNA標(biāo)記視錐細(xì)胞而不標(biāo)記視桿細(xì)胞。在乳腺、乳腺上皮細(xì)胞呈PNA陽性反應(yīng)而肌上皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞呈PNA陰性反應(yīng)。以多種凝集素對小鼠、大鼠和兔的腎組織切片進(jìn)行染色結(jié)果表明，刀豆素A和蓖麻素存在于腎臟的各部，PNA和雙花扁豆凝集素（DBA）主要分布于遠(yuǎn)曲小管和集合小管上皮細(xì)胞，荊豆凝集素（UEA）主要分布在血管內(nèi)皮細(xì)胞，而麥芽素分布在腎小球。應(yīng)用DBA對RIII和DDK品種的小鼠研究表明，DBA主要結(jié)合在各種組織內(nèi)毛細(xì)血管內(nèi)皮細(xì)胞上，電鏡觀察顯示DBA結(jié)合在內(nèi)皮細(xì)胞的表面，在趣的是在RIII品系小鼠某些組織的內(nèi)皮細(xì)胞顯示肯定的DBA陰性反應(yīng)，說明同一種屬動物的血管內(nèi)皮細(xì)胞也存在有組織特異性的差別。Streit和Kreutzberg（1987）發(fā)現(xiàn)Griffonia Simplicifolia凝集素特異性標(biāo)記面神經(jīng)節(jié)　內(nèi)的小膠質(zhì)細(xì)胞，其它類型的膠質(zhì)細(xì)胞如星狀膠質(zhì)細(xì)胞（astrocyte）等都顯示陰性反應(yīng)。在切斷面神經(jīng)后，增殖的小膠質(zhì)細(xì)胞對Griffonia Simplicifolia凝集素的反應(yīng)加強(qiáng)，免疫電鏡觀察表明，凝集素主要沉積在細(xì)胞膜或小膠質(zhì)細(xì)胞突起的軸膜表面，特異性結(jié)合糖基是α—D—半乳糖。上海醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院免疫病理室應(yīng)用12種凝集素（表6-1）對人胚胎及各種正常組織進(jìn)行了系統(tǒng)的凝集素受體的定位研究，結(jié)果表明，凝集素受體的分布并無即定規(guī)律可尋。如胃粘膜主細(xì)胞為PNA受體，而壁細(xì)胞為BSL受體，雙花扁豆受體（DBA）主要出現(xiàn)在大腸部份。

 

      3．在腫瘤中凝集素結(jié)合的改變 　腫瘤細(xì)胞伴有細(xì)胞膜的改變，細(xì)胞膜上的糖基也會產(chǎn)生相應(yīng)的變化，可用凝集素檢測出來。大量研究發(fā)現(xiàn)，凝集素可作為腫瘤組織源性的標(biāo)記、腫瘤特異性診斷的標(biāo)志、腫瘤惡性的標(biāo)記和不同腫瘤的分化標(biāo)記。如張華忠等（1987）報(bào)道115例胃癌標(biāo)記PHA陽性率高達(dá)90.43%，而正常胃粘膜基本是陰性，故認(rèn)為PHA是胃癌的診斷性標(biāo)志。BSA對乳腺惡性腫瘤陽性率達(dá)79%，而對良性病變均呈陰性反應(yīng)，提示BSA可能為乳腺惡性腫瘤的相關(guān)標(biāo)志。凝集素還有助于判別腫瘤的組織類型，如神經(jīng)系統(tǒng)星形細(xì)胞瘤ConA陽性，小膠質(zhì)細(xì)胞瘤陰性，腎腺癌UEA1陰性，透明細(xì)胞癌陽性。